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sam和bam处理案例

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生信喵实验柴
发布2022-10-25 19:24:15
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samtools使用案例演示

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mkdir 52.samtools;cd 52.samtools;
cp ../52.bwa/mgh78578.sam all.sam

#1 sam文件验证
samtools quickcheck *.sam  && echo 'all ok' || echo 'fail!'

#2 sam和bam格式转换
samtools view -O bam -o all.bam all.sam  
samtools view all.bam -o all.sam
#转换成cram格式,很少用
samtools view -O cram -o all.cram all.sam -T MGH78578.fasta

#3 bam排序
samtools sort -@ 4 -m 12G -O bam -o all.sorted.bam all.sam  

#4 排序后建立索引
samtools index all.sorted.bam  

#5 比对结果统计
samtools stats all.sorted.bam

#6 按照flag值进行统计
samtools flagstat all.sorted.bam

#7 按不同染色体统计
samtools idxstats all.sorted.bam 

#8 统计目标区域覆盖度
samtools bedcov test.bed all.sorted.bam

#9 统计每个位点测序深度depth
samtools depth all.sorted.bam

#10计算覆盖比率
samtools coverage all.sorted.bam

#11 按照染色体拆分bam
bamtools split -in all.sorted.bam -reference
拆成双端和单端
bamtools split -in all.sorted.bam -paired -stub un

#12 合并bam
samtools cat -o cat.bam all.sorted.REF_contig_1_pilon.bam all.sorted.REF_contig_2_pilon.bam all.sorted.REF_contig_3_pilon.bam all.sorted.REF_unmapped.bam
samtools merge merge.bam all.sorted.REF_contig_1_pilon.bam all.sorted.REF_contig_2_pilon.bam all.sorted.REF_contig_3_pilon.bam all.sorted.REF_unmapped.bam
#13 统计bam并绘图  
samtools stats all.sorted.bam >all.stats  
plot-bamstats -p test all.stats 

#14 重新打乱
samtools collate all.sorted.bam -o all.shuffle.bam

#15 过滤数据
#将没有比对上的reads筛选出来
samtools view -f 4 all.sorted.bam

#16 保留比对上的reads输出出来
samtools veiw -F 4 all.sorted.bam

#17 输出fastq格式 
samtools fastq all.sorted.bam -1 A.1.fq.gz -2 A.2.fq.gz
#输出fasta格式
samtools fasta all.sorted.bam -1 A.1.fa.gz -2 A.2.fa.gz

#18 文本方式查看结果tview  
samtools tview all.sorted.bam  
samtools tview all.sorted.bam ref.fna  

#19 bam转换为bed格式
bedtools bamtobed -i all.sorted.bam

#20 mpileup
samtools mpileup --reference ../data/mgh78578.fasta  all.sorted.bam

写在最后:有时间我们会努力更新的。大家互动交流可以前去论坛,地址在下面,复制去浏览器即可访问,弥补下公众号没有留言功能的缺憾。原地址暂未启用(bioinfoer.com)。

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