ZETA life转染试剂助力揭示lncRNA Gm28309在RAW264.7和THP-1巨噬细胞中调控布鲁氏菌炎症反应的ceRNA机制

1. 文章主要研究方向

标题：《Brucella-Induced Downregulation of lncRNA Gm28309 Triggers Macrophages Inflammatory Response Through the miR-3068-5p/NF-κB Pathway》

方向：研究布鲁氏菌（Brucella）感染如何通过下调长链非编码RNA（lncRNA Gm28309）激活miR-3068-5p/NF-κB信号通路，从而触发巨噬细胞的炎症反应及其分子机制。

2. 2024年影响因子

期刊：Frontiers in Immunology

影响因子：约8.8。

3. ZETA life转染试剂（AD600150）的应用

转染细胞及基因：

• RAW264.7细胞（小鼠巨噬细胞系）：

  ◦ 转染基因：lncRNA Gm28309过表达质粒（Gm28309-pcDNA3.1）、miR-3068-5p mimic/inhibitor、siRNA靶向p65（NF-κB抑制剂）。

• THP-1细胞（人单核细胞系，经PMA诱导为巨噬细胞）：

  ◦ 转染基因：siRNA靶向候选lncRNAs（如P33714、P3852等）。

4. 转染实验数据及解读

具体实验数据：

1. RAW264.7细胞转染Gm28309（图4A, 4D）：

  ◦ 结果：过表达Gm28309显著降低NLRP3炎症小体蛋白（NLRP3、Pro-caspase-1）和炎性因子（IL-1β、IL-18）的表达（p<0.05）。

  ◦ 解读：ZETA life试剂高效递送Gm28309质粒，验证了其对炎症的负调控作用。

2. THP-1细胞转染siRNA靶向lncRNAs（图3A, 3B）：

  ◦ 结果：敲低P33714（Gm28309人源同源物）增加IL-1β/IL-18分泌，促进布鲁氏菌清除（p<0.01）。

  ◦ 解读：试剂成功递送siRNA，证明lncRNA在炎症中的关键角色。

3. RAW264.7转染miR-3068-5p mimic（图5C, 5D）：

◦ 结果：miR-3068-5p过表达降低kB-Ras2（NF-κB抑制因子）的荧光素酶活性，激活炎症通路。

  ◦ 解读：试剂高效转染miRNA，揭示ceRNA调控机制。

ZETA life试剂的贡献：

• 高转染效率确保基因操作（过表达/敲低）的可靠性，支撑了全文分子机制验证。

• 低细胞毒性保障了炎症相关基因表达的精准检测。