circ-0008102过表达与敲低：ZETA life转染试剂在K562细胞中的应用

1. 文章主要研究方向

  • 期刊：European Journal of Pediatrics

  • DOI：https://doi.org/10.1007/s00431-023-05398-y(https://doi.org/10.1007/s00431-023-05398-y)

• 研究方向：

       本研究探讨了外周血环状RNA circ-0008102 在β-地中海贫血（β-thalassemia, β-thal）患者中的表达及其作为新型临床生物标志物的潜力。研究发现，circ-0008102在未输血治疗的β-thal患儿中显著上调，并通过调控γ-珠蛋白表达参与疾病进展。

2. ZETA life Advanced DNA RNA转染试剂（货号：AD600150）的应用

  • 转染细胞：K562细胞（人慢性髓系白血病细胞系）。

  • 转染基因：

◦circ-0008102过表达载体（circ-0008102 overexpression vector）

◦circ-0008102 siRNA（si-circ-0008102，序列：5'-GAACGGGGACACUUAGUCGTT-3'）

    ◦阴性对照（si-control，序列：5'-UUCUCCGAACGUGUCACGUTT-3'）

3. 转染实验数据及解读

  • 实验数据来源：

    ◦Supplementary Fig. S1：circ-0008102过表达或敲低对γ-珠蛋白mRNA表达的调控（P<0.05）。

◦Supplementary Fig. S3：circ-0008102过表达抑制miR-372-3p、miR-329-5p等5种miRNA的表达（P<0.001），敲低则增加其表达（P<0.05）。

  • 数据解读：

    ◦ZETA life转染试剂高效递送circ-0008102载体和siRNA至K562细胞，验证了circ-0008102通过调控γ-珠蛋白和miRNAs参与β-thal的分子机制。

    ◦转染效率高，数据重复性好，支持了circ-0008102作为生物标志物的结论。

  • 主要贡献：

    ◦为circ-0008102功能研究提供可靠的基因操作工具。

    ◦证实circ-0008102通过miRNA海绵作用调控下游靶基因。