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人-胸腺肿瘤组织细胞悬液制备流程

分享是一种态度 注 | 以上操作指南中涉及的消化酶以及实验方法仅供参考,实际应用过程中请根据具体情况进行细节上的调整。 背景介绍 胸腺属于中枢淋巴器官,分左右两叶,表面有薄层结缔组织被膜。...胸腺瘤起源于胸腺上皮细胞,是最常见的前上纵隔原发性肿瘤。 对于胸腺瘤组织的单细胞悬液一般使用美天旎公司的肿瘤组织试剂盒制备。...胸腺组织示意图 实验仪器及耗材 实验步骤 准备肿瘤解离试剂盒的酶混合液,将100µL的H酶、500 µL的R酶和25 µL的A酶加入到4.4mL RPMI 1640培养基中。...运行gentle MACS解离器中的h_Tumor_01程序。 程序终止后,将C管从gentle MACS解离器上拆下。 使用MACS mix试管旋转器在37℃下连续旋转C管30 min。...使用适当体积的缓冲液重悬细胞,使用台盼蓝血细胞计数仪分析细胞数量和活性。 检测细胞活性,活性在85%以上可用于后续测序实验。

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人胸腺基质的单细胞转录谱揭示胸腺髓质中新的细胞异质性

最近的证据表明,胸腺基质由功能上不同的亚群组成,但人类胸腺中这种细胞异质性的程度尚不清楚。文章使用单细胞转录组测序来全面分析跨生命多个阶段的人类胸腺基质。...通过酶消化胸腺组织获得基质细胞,然后使用磁珠或基于荧光激活细胞分选 (FACS) 的 CD45 阴性细胞纯化耗尽 CD45 阳性免疫细胞,从而导致EpCAM + CD45 -上皮细胞和 EpCAM -...鉴定了三种上皮细胞(EPCAM和KRT8作为一般上皮标记物和FOXN1、PSMB11、LY75、CLDN4、AIRE、IVL, NEUROD1 , MYOD1作为特定亚群的标志物), 一种间叶细胞 (...神经嵴、间充质和内皮细胞对于通过产生可溶性因子和细胞间相互作用来支持胸腺生成的胸腺微环境的建立很重要。但是这些可溶性因子在人类胸腺发育中的功能和细胞类型特异性尚不清楚。...内皮细胞还表达细胞外基质和粘附分子,如纤连蛋白 ( FN1 ) 和LGALS3,它们已被证明可调节胸腺细胞迁移。

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    再谈T细胞:起源、分化和分群

    T细胞发育 T细胞来源于骨髓中的淋巴样祖细胞,在胸腺中分化、发育、成熟。在胚胎发育早期,T细胞的前体干细胞经血流输送到胸腺,从胸腺的浅皮质向深皮质、髓质移行,并发育为成熟的T细胞。...在接受有序、规范的“培训”之后,成熟T细胞进入血液,转移至外周淋巴组织(如脾脏、淋巴结等),在接受刺激后,再分化为效应性或记忆性T细胞,参与适应性免疫。 ? T细胞为什么从骨髓迁移至胸腺发育、成熟?...在T细胞发育早期,敲除 Notch1基因后, 胸腺细胞呈现出B细胞谱系的表型,而Notch1基因存在时,胸腺细胞呈现为T细胞谱系的表型。上述研究说明,Notch信号通路是T细胞活下来的必要条件。...在胸腺皮质中,该类细胞与胸腺上皮细胞表达的抗原肽-MHC复合物以适当亲和力进行特异结合,则可继续分化为CD4+或CD8+单阳性(SP)细胞。...那么,如何在体内和体外检测CTL的功能呢?体内检测CTL功能的方法: 1)体内细胞毒性杀伤实验; 2)抗原肽-MHC分子四聚体技术; 3)ELISPOT; 4)LDH释放法。 ?

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    如何在服务器中Ping特定的端口号,如telnet Ping,nc Ping,nmap Ping等工具的详细使用教程(Windows、Linux、Mac)

    猫头虎 分享:如何在服务器中Ping特定的端口号? 网络调试的实用技巧,学会这些工具,你将成为运维与开发中的“Ping”王!...在日常开发和运维中,我们经常需要检查目标主机上的某个端口是否开启,并确定网络连通性。...使用 Telnet Ping 端口 Telnet 是检查端口连通性的经典工具,虽然简单,但功能强大。...使用 nmap Ping 端口 Nmap 是一款专业的网络扫描工具,适合批量测试。...三、跨平台对比 工具 简单性 功能性 扫描速度 安装难度 适用场景 Telnet ⭐⭐⭐ ⭐ 快速 简单 测试单端口 nc ⭐⭐⭐⭐ ⭐⭐⭐ 快速 简单 高效测试多个端口 nmap ⭐⭐⭐ ⭐⭐⭐⭐ 较慢

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    细胞图谱 | Nature | 空间定位的人类胸腺细胞图谱映射到连续的组织轴上

    除了粗略地分为皮质和髓质外,胸腺还有二级形态结构,如髓质哈氏小体(HCs),以及不太明确的区域,如高度血管化的皮髓交界区,通常被称为血管周围空间(PVS)。...这些注释随后可用于基于两个或多个组织学标志物之间的距离测量构建 CCF(OrganAxis)(图 1e(中))。...为了包埋,胎儿或儿童胸腺组织首先转移到 PBS 中,然后放在冰上几分钟,以清除多余的培养基和保存液(如 HypoThermosol)。...此外,我们还手动标注了各个胸腺小叶及特定结构,如囊/边缘、冷冻/切片伪影、HCs、PVS 和胎儿胸腺相关淋巴聚集体(如先前定义)。 形态学注释和评估是在与专家人类胸腺病理学家协商后完成的。...然后,将每种稀释后的抗体亚库存的 2 µl 结合到主混合液中,该混合液被加入到细胞中,在总体积为 200 µl 的条件下进行标记。 有关 TotalSeq-C 抗体的详细信息见补充表 6。

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    综述:变温动物的适应性免疫

    某些免疫特征,如免疫球蛋白M(IgM)的结构和功能,以及胸腺、脾脏、常规αβT细胞受体(TCRs)和MHCⅡ类分子的存在,将在本综述中较为详细地描述,在几乎所有的有颚类脊椎动物(gnathostomes...除了T细胞依赖性外,对哺乳动物外IgY类转换(见下文)的条件知之甚少。...鳕鱼可能通过表达过多的非经典的MHCⅠ类基因来弥补,可能会选择一个具有多个自然杀伤T(NKT)样细胞的系统。 3. 两栖动物经历了蜕变,在这一转变过程中,适应性免疫发生了广泛的变化。...Fig 4 14 The thymus 胸腺存在于所有的有颚类,通常有典型的皮质和髓质组织。它可以从一个小叶到一个多叶甚至不连续的结构,取决于所观察的物种或发育阶段。...因此,FDC的出现为生发中心的发展提供了条件,也为高亲和力成熟的产生提供了选择环境。

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    人类胸腺发育的细胞图谱揭示了T细胞组库的形成

    RESULTS:作者从人类胸腺中鉴定出了超过 50 种状态的细胞。人胸腺中的细胞状态、丰度及基因表达谱随着胎儿及出生后发育呈动态变化。作者鉴定出了新的胸腺成纤维细胞和上皮细胞,并对其进行了定位。...regression model),用以预测因转录相似性而被软件聚到一起的混合细胞亚群 对粗略注释的细胞分群(如上皮细胞、单阳性 T 细胞等),将其提取出来重复 HVGs 选择、降维和聚类流程,以获取更精细的细胞亚群(如髓质胸腺上皮细胞...mTEC 或调节性 T 细胞等) 估计细胞类型的比例: 作者首先宽泛地定义细胞类型(如淋巴细胞、髓细胞等),并计算每种类型在选定的对比组之间的比例 如果一次比较中的所有细胞类型均来自同一个分选门,则将比例简单定义为...根据特异性的显著程度选取相互作用对(interaction pairs)进行可视化 整合公共数据: 同样使用了 BBKNN 方法 跨物种比较: 使用前述流程对小鼠数据集做预处理,包括归一化、批次整合、...胸腺基质和 T 细胞的协调发育 早期胎儿胸腺(7 - 8 PCW)中,淋巴细胞主要包括 NK 细胞、γδ T 细胞和 ILC3;分化中的 αβ T 很少,主要处于 DN 阶段。

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    NATURE|人类突变特征

    SignatureAnalyzer分析突变特征 SignatureAnalyzer使用一种NMF的贝叶斯转换,通过自动相关性确定技术来推断特征的数量,并为特征配置文件和属性提供高度可解释性和稀疏表示,在数据拟合和模型复杂性之间取得平衡...本工作使用了两种基于非负矩阵分解的方法(NMF): SigProfiler,是以前的COSMIC突变特征纲要框架的精进版本,以及SignatureAnalyzer,是基于NMF的贝叶斯转换。...以前的一些特征分为多个组成特征。SignatureAnalyzer和SigProfiler的结果在整个研究中使用。...ID13的主要特征是胸腺嘧啶-胸腺嘧啶二核苷酸的胸腺嘧啶缺失,并在皮肤的恶性黑色素瘤中表现出大量突变(图2,3)。...结果表明,多个突变过程在正常细胞中运行。 小编总结 癌症基因组中的体细胞突变是由多个突变过程引起的,每一个突变过程都产生一种特征性的突变特征。

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    NatGenet | 细胞注释新工具,使用 popV 在单细胞数据中进行细胞类型标签的共识预测

    在多个案例研究中,popV 能够自信地注释大多数细胞,同时突出显示通过标签转移难以注释的细胞群体。...在多个数据集中,如新细胞亚型的识别或标记基因的重新定义等因素,导致细胞类型识别的差异。 有许多自动化的细胞类型注释方法。...特别是,胸腺随着年龄的增长而退化,我们在这里使用的成人胸腺并不能准确代表年轻个体的胸腺结构和功能。...我们证明了预测得分可以识别出特定于查询数据集的细胞类型(如中颞回(MTG)特异性神经元)、在参考数据集中错误注释的细胞类型(如Tabula Sapiens中的CD4 T细胞亚群)或在查询数据集中错误注释的细胞类型...(如胸腺中的淋巴管内皮细胞),以及虽然存在于两个数据集中但在参考数据集中未被注释的细胞类型(如Tabula Sapiens中的肺中间毛细血管内皮细胞)。

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    Nat Biotechnol 恭喜胡鹏、邱琪丨吴昊团队开发同时检测DNA 5hmC5mC修饰的单细胞测序技术

    哺乳动物细胞中,DNA胞嘧啶甲基化可以被TET家族蛋白氧化,进而去甲基化,从而动态调控基因组中的胞嘧啶修饰( 图1a, b)【1】。...胞嘧啶羟甲基化修饰(5hmC)是基因组中丰度最高的去甲基化中间产物(尤其在神经细胞中),可能发挥着重要的功能【2】。...但是由于传统的亚硫酸盐测序技术(Bisulfite sequencing)无法区分5mC 和5hmC修饰(图1c),研究团队在2018年研发了ACE-seq技术能在单碱基分辨率上鉴定5hmC修饰【3】,然而如何在单细胞水平对这两种...这项技术的核心是通过化学脱氨和APOBEC3A (A3A) 酶促脱氨两个步骤(图2a),将未修饰的胞嘧啶 (C) 和甲基化修饰的胞嘧啶(5mC)分别转化为尿嘧啶(U)或胸腺嘧啶(T),并在最终的测序结果中转化为胸腺嘧啶...通过系统的优化脱氨反应条件和文库构建的关键步骤,作者提高了检测的灵敏度和稳定性(snhmC-seq2技术),进一步开发出同时检测5mC和5hmC的Joint-snhmC-seq技术(图2b)。

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    【机器学习】朴素贝叶斯算法详解与实战扩展

    特征条件独立假设 朴素贝叶斯算法的核心假设是特征之间相互独立,即一个特征的出现与其他特征无关。这个假设极大地简化了计算过程,因为我们可以将联合概率分布分解为多个边缘概率分布的乘积。...然而,这个假设在现实中往往不成立,但实验表明,朴素贝叶斯分类器在许多情况下仍然能够取得很好的分类效果。 参数估计 在朴素贝叶斯算法中,我们需要估计先验概率 P(Y) 和条件概率 P(X|Y) 。...缺点 特征条件独立假设不成立: 朴素贝叶斯算法最大的缺点在于其假设特征之间相互独立,这一假设在现实中往往不成立。...为了缓解类别不平衡问题,可以采用重采样技术(如过采样、欠采样等)来调整数据集的类别分布,或者使用能够处理类别不平衡的评估指标(如F1分数、ROC曲线等)来评估算法的性能。...尽管其特征条件独立假设在现实中往往不成立,但这一假设的简化使得算法的计算过程变得非常高效。通过合理的数据预处理和特征选择,朴素贝叶斯算法能够在许多实际应用中取得较好的成绩。

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    金融数据挖掘之朴素贝叶斯

    贝叶斯开创了统计学的贝叶斯学派,用先验知识和逻辑推理来处理不确定命题,与古老的频率学派分庭抗礼,频率学派只从数据中获得信息,完全不考虑先验知识,即人的经验。...=Si/S,Si是类Ci中的训练样本数,S是训练样本总数; (2)P(X|C=i)的计算开销可能非常大,因为会涉及到很多属性变量,这里可以做“属性值互相条件独立”的假定,即属性间不存在依赖关系: ?...它发源于贝叶斯定理,有着坚实的数学基础和稳定的分类效率,但受制于一些假定的不准确性(如类条件独立),以及缺乏可用的概率数据,该算法的准确率可能没有理论表现的那么美好。...然而,它的计算量比第一集中的Knn要小很多,其简单的算法又可以与第二集介绍的决策树和以后要接受的神经网络相媲美,是使用最广泛的分类模型之一。 三、金融应用实例 1....python中实现对未知样本test的朴素贝叶斯分类呢?

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    生信程序 | 基因水平的单细胞轨迹对齐 | Nat.Methods |

    目前比较轨迹的方法通常使用动态规划,但受限于存在明确匹配等假设条件。 在此,我们描述了一种名为 Genes2Genes 的贝叶斯信息论动态规划框架,用于对齐单细胞轨迹。...G2G 使用一种动态规划(DP)算法,通过结合经典的 Gotoh 算法与动态时间规整(DTW),并采用贝叶斯信息理论评分方案来量化基因表达分布的距离,从而以正式的方式处理匹配和不匹配的情况。...可以使用用户定义的阈值进行局部 DTW 或对 DTW 对齐结果进行事后处理(如 TrAGEDy 中的方法)以取消映射不相似的时间点,但其基本假设仍然是存在明确的匹配关系。...为了在体外模型系统中研究人类 T 细胞发育,我们使用人工胸腺类器官 (ATOs) 将诱导多能干细胞 (iPS) 分化为成熟的 T 细胞。...IL7R在成熟的单阳性胸腺细胞中开始表达,其表达依赖于NF-κB信号传导。 体外和体内的IL7R表达距离在TNF处理后显著下降,并且如预期那样,其表达增加,表现出成熟T细胞的特征。

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    如何在Ubuntu 14.04上安装MemSQL

    先决条件 要学习本教程,您需要: 一个Ubuntu 14.04 x64 腾讯CVM,至少8 GB RAM,没有服务器的同学可以在这里购买,不过我个人更推荐您使用免费的腾讯云开发者实验室进行试验,学会安装后再购买服务器...当叶节点从聚合器节点接收到读取或写入数据的请求时,它执行该查询并将结果返回到聚合器节点。MemSQL允许您跨多个主机共享数据,每个叶节点都有一部分数据。...(即使使用单个叶节点,您的数据也会在该叶节点内拆分。) 当您有多个叶节点时,聚合器负责将MySQL查询转换为该查询中应该涉及的所有叶节点。...以下是您可能会看到的结果示例: 我们将不介绍如何在本教程中跨多个服务器安装MemSQL,但为了进行比较,这里是一个带有三个8GB Ubuntu 14.04节点(一个聚合器节点和两个叶节点)的MemSQL...使用能够理解JSON的横向扩展SQL数据库以及如何在表之间任意连接的灵活性是一个强大的用户功能。

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    决策树1:初识决策树

    用决策树分类:从根节点开始,对实例的某一特征进行测试,根据测试结果将实例分配到其子节点,此时每个子节点对应着该特征的一个取值,如此递归的对实例进行测试并分配,直到到达叶节点,最后将实例分到叶节点的类中。...决策树表示给定特征条件下,类的条件概率分布,这个条件概率分布表示在特征空间的划分上,将特征空间根据各个特征值不断进行划分,就将特征空间分为了多个不相交的单元,在每个单元定义了一个类的概率分布,这样,这条由根节点到达叶节点的路径就成了一个条件概率分布...图b中的条件概率分布对应于图a的划分;当某个单元C的条件概率满足时,即认为该类属于正类,落在该单元的实例都视为正例。 ? 下图c表示了根节点到各个叶子结点上不同划分的条件分布。 ?...从另一个角度看,决策树学习是由训练数据集估计条件概率模型。基于特征空间划分的类的条件概率模型有无穷多个。我们选择的条件概率模型应该不仅对训练数据有很好地拟合,而且对未知数据有很好地预测。...在对此有一定了解之后,我们先看看,如何在sklearn中将决策树用起来。然后再学习其中的细节。

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    【温故】金融数据挖掘之朴素贝叶斯

    贝叶斯开创了统计学的贝叶斯学派,用先验知识和逻辑推理来处理不确定命题,与古老的频率学派分庭抗礼,频率学派只从数据中获得信息,完全不考虑先验知识,即人的经验。...i) = Si/S,Si 是类Ci 中的训练样本数,S 是训练样本总数; (2)P(X|C=i) 的计算开销可能非常大,因为会涉及到很多属性变量,这里可以做“属性值互相条件独立”的假定,即属性间不存在依赖关系...但受制于一些假定的不准确性(如类条件独立),以及缺乏可用的概率数据,该算法的准确率可能没有理论表现的那么美好。...然而,它的计算量KNN要小很多,其简单的算法又可以与决策树和神经网络相媲美,是使用最广泛的分类模型之一。...python中实现对未知样本test的朴素贝叶斯分类呢?

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    【机器学习】解构概率,重构世界:贝叶斯定理与智能世界的暗语

    先验概率:计算每个类别在训练数据中的比例。 条件概率:在每个类别下,计算每个特征的条件概率。为了避免零概率问题,我们使用了拉普拉斯平滑。...1.5.2 贝叶斯方法的挑战 条件独立性假设:朴素贝叶斯假设特征之间相互独立,这在实际中往往不成立,可能影响模型性能。...2.3.1 多类别朴素贝叶斯 多类别朴素贝叶斯扩展了二分类的朴素贝叶斯分类器,能够处理多个类别的分类任务。 特点: 适用于多分类问题,如文本分类中的主题分类。 保持了条件独立性假设,计算简单高效。...特点: 适用于连续特征,如身高、体重、温度等。 利用高斯分布的概率密度函数计算条件概率。...模型假设限制:贝叶斯方法依赖于模型假设,如条件独立性和分布假设,若假设不成立,可能导致偏差。 实现复杂:相较于一些简单的机器学习算法,贝叶斯方法的实现和调试更为复杂,尤其是对于非专业人士。

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    Trends in Cognitive Sciences综述:学习和记忆中的背景推理

    但是情境性的恐惧条件反射是如何在野外发生的呢?当一只老鼠从森林的空地上逃离雪貂时,什么构成了这种可怕记忆的“背景”?...例如,有人认为,经典和操作性条件反射中经典的平滑增加(最终渐近)学习曲线(如正文图4中模拟的学习曲线)是群体平均的人为因素。...(A)纯适当的学习:对应的“偶发事件”(例如,定义的条件刺激(CS),或运动目标)可以总结为简单的一个标量,如接收无条件刺激的概率(US)的反馈状态,或力扰动的大小当达到目标。...其中一些已经明确地表达了与我们之前描述的背景学习模型类似的贝叶斯术语,如基于卡尔曼滤波的运动学习模型,或经典条件反射,或使用奖励偶发的贝叶斯先验的经济决策模型。...在背景学习的背景下,层次狄利克雷过程(HDP)是一个贝叶斯非参数模型,被提出作为人类如何在多背景环境中平衡专业化和泛化之间的权衡的模型。

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    SQL中SELECT语句详解「建议收藏」

    简单查询SELECT-FROM 用于无条件查询单张表中的行或列 假设有表如图所示 查询名字叫 ‘叶清逸’ 的记录: select * from T_USER where u_name = '叶清逸...使用AS给查询结果取别名(AS也可以省略): --可加""也可不加 如果不加双引号默认字母大写 如果需要小写字母或别名由多个字母组成则需要加上双引号。...=’ SQL中可以使用 条件运算符 ‘’ ‘>=’ ‘!=’ 过滤查询结果中的某些行,多个条件之间可以用 ‘and’ 连接。...= '叶清逸' ; NOT写法 select * from T_USER where u_name not like '叶清逸' ; 查询结果: 模糊查询LIKE SQL中可以使用模糊查询like...如:like ‘%#_%’ escape ‘#’ 查询排序ORDER BY SQL中可以对查询结果进行排序,DESC表示按从大到小排序,ASC表示按从小到大排序,默认为从小到大排序。

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    朴素贝叶斯算法优化与 sklearn 实现

    引言 上一篇日志中,我们主要介绍了贝叶斯算法,并提供了 python 实践: 朴素贝叶斯算法的推导与实践 但运行上一篇日志中的示例,我们发现出现了下面的结果: ['love', 'my', 'dalmation...拉普拉斯平滑 上一篇文章中,我们利用贝叶斯分类器对文档进行分类时,需要算多个概率的乘积以获得文档属于某个类别的概率,即计算 p(w0|1) p(w1|1) p(w2|1),只要有一个概率值为0,那么最终的结果就会随之变成...解决办法很自然的可以想到 — 将乘法运算转换为加法运算,但如何在保证算法正确性的前提下进行转换呢?...使用 sklearn 实现朴素贝叶斯算法 sklearn 提供了朴素贝叶斯算法的实现类 — sklearn.naive_bayes.MultinomialNB。...后记 对于相互独立的样本来说,朴素贝叶斯是一个非常不错的分类器,在自然语言处理和文本特征分析、过滤等领域有着广泛的应用。 事实上,朴素贝叶斯共有三种模型,他们的区别在于计算条件概率的公式不同: 1.

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