探究实验设计：Rescue实验（回复实验）

一.什么是Rescue实验：

Rescue实验本质是一个对照实验。

举个例子：

细胞或体内，

上调A因素，导致了B结果的出现；

下调A因素，是否可以挽救/逆转B结果的出现？

举个实际例子：

要证明M过表达通过促进N的表达来促进肿瘤生长，需要设计两个部分：

1. M的过表达是否促进肿瘤生长（发生了变化）；

2. N的表达/沉默/突变对M促进肿瘤生长的影响（rescue的过程）。

二.为什么要做Rescue实验？

这是为了更加准确的证实一个表型与分子的表达（药物）之间存在因果关系。

在同一个条件下：

先正向再反向，

或者先反向再正向，

观察表型的得而复失或者失而复得。

以此排除现象背后的假阳性本质，降低主观性因素影响，建立可靠的因果逻辑。

三.如何设计Rescue实验？

我们以单因素Rescue实验为例：

1.当A对B是正向调控关系的时候，Rescue实验设计如下：

举个真实例子：

HOTTIP过表达促进肝癌细胞生长；

HOTTIP沉默逆转了上述作用。

实现了单因素Rescue。

2.当A对B是负向调控关系的时候，Rescue实验设计如下：

小结：

Rescue实验的设计：

若正则负，若负则正；

若上则下，若下则上。

四.思考题：

看一看下面两道题目的Rescue实验。

（2023年山东卷节选）强光条件下，植物吸收的光能若超过光合作用的利用量，过剩的光能可导致植物光合作用强度下降，出现光抑制现象。

为探索油菜素内酯（BR）对光抑制的影响机制，将长势相同的苹果幼苗进行分组和处理，如表所示，其中试剂L可抑制光反应关键蛋白的合成。

各组幼苗均在温度适宜、水分充足的条件下用强光照射，实验结果如图所示。

（2022年山东卷节选）迷走神经是与脑干相连的脑神经，对胃肠的蠕动和消化腺的分泌活动起促进作用，还可通过一系列过程产生抗炎效应。研究人员对图中抗炎过程进行了相关实验，实验分组及结果见表。通过腹腔注射脂多糖（LPS）可使大鼠出现炎症，检测TNF-α浓度可评估炎症程度。据图分析，若丙组的A处理仅在肠巨噬细胞内起作用，推测A处理的3种可能的作用机制：______；______；______。

参考文献：

《生命科学实验设计指南》。格拉斯；

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