空间转录组零代码全流程分析教程
filtered_feature_bc_matrix.h5+spatial图像文件夹的这种最优标准格式的数据读取(单个样本的情况)
10X空间转录组数据经过上游的定量分析后的输出数据最标准的格式应该每个样本都有一个目录,该样本目录内有一个filtered_feature_bc_matrix.h5+spatial图像文件夹
以GSE267029数据集的下载和里面的单个样本的分析为例
空间转录组数据的下载和解压
在该GEO数据集网页下方Download栏处我们点击http来下载GSE267029_RAW.tar这个压缩包。
该压缩包解压后的内容为:
该数据集是有两个样本,每个样本一个目录,每个样本目录里面的空转数据都是标准格式的空转数据。具体内容如下:
spatial目录里面存放了空间位置信息文件(tissue_positions_list.csv) 及 H&E 染色切片(png或jpg图片)
每个样本都有一个h5文件和spatial目录,我们一般会参考每个样本的切片在很多分析步骤里对每个样本都进行单独分析,这里以GSM8258690_ST_STD这个样本的读取和构建分析对象为例
spatial目录下面必须要有的文件包括:
scalefactor_json.json
tissue_hires_image.png
tissue_lowres_image.png
tissue_positions_list.csv
软件分析模块的位置和界面
分析模块位置
分析模块界面
执行结果
结果文件列表
分析结果中有一个空转的seurat对象的rds文件和一个meta.data文件。meta.data文件对于我们做空转的下游分析是非常重要的,我们可以看下meta.data文件中的内容。该结构的meta.data文件内容如下:
filtered_feature_bc_matrix.h5+spatial图像文件夹的这种最优标准格式的数据读取(多个样本的情况)
以GSE267029数据集的下载和里面的单个样本的分析为例
空间转录组数据的下载和解压
在该GEO数据集网页下方Download栏处我们点击http来下载GSE267029_RAW.tar这个压缩包。
该压缩包解压后的内容为:
该数据集是有两个样本,每个样本一个目录,每个样本目录里面的空转数据都是标准格式的空转数据。
spatial目录里面存放了空间位置信息文件(tissue_positions_list.csv) 及 H&E 染色切片(png或jpg图片)
软件分析模块的位置和界面
分析模块位置
执行结果结果文件列表
结果文件内容
可以看到结果生成了一个空转seurat分析对象的rds文件,还有两个meta.data文件。一个是GSM8258691.meta_data.csv,一个是GSM8258690.meta_data.csv。
对于多样本空转数据而言,sample.id即空转的样本编号就是meta.data文件的文件名中去掉.meta_data.csv前面的那一部分的名字,比如这里就是meta.data文件名前面的GSM8258691和GSM8258690就是样本编号名。
同时meta.data中的orig.ident列也能看到该样本的编号名。
h5+spatial_zip压缩包类型的空间转录组数据读取
该类型的空转数据集示例
软件分析模块位置和分析界面
运行完成的结果
h5+images类型的空间转录组数据读取
该类型的空转数据集示例
软件分析模块的位置和分析界面
运行完成的结果
10x+images类型的空间转录组数据读取
该类型的空转数据集示例
软件分析模块位置和运行界面
运行完成的结果
空间转录组的基础可视化
这一步使用的数据都是上一步读取空转数据构建的分析对象
初步使用小提琴图可视化空间转录组
软件分析界面
运行结果
初步使用FeaturePlot可视化空间转录组
分析界面
运行结果
空转数据处理和可视化
对空间转录组数据进行归一化处理
软件分析界面
运行结果
基因表达可视化
软件分析界面
运行结果
尝试不同分辨率对空转降维聚类
软件分析界面
运行结果
指定每个样本最好的聚类分辨率进行可视化
软件分析界面
运行结果
空转降维聚类结果可视化
使用UMAP或TSNE可视化空转降维聚类结果
软件分析界面
运行结果
在切片上可视化空转所有聚类结果
软件分析界面
运行结果
单独对每个cluster在切片上进行重点可视化
软件分析界面
运行结果
空间可变特征差异基因的识别和可视化
计算每个cluster的空间差异基因
软件分析界面
运行结果
可视化感兴趣的具有空间差异的基因
软件分析界面
运行结果
空转的单细胞分辨率预测和可视化
利用参考的单细胞数据来反卷积得到空间单细胞图谱
软件分析界面
运行结果
在空转切片上可视化指定的细胞类型
软件分析界面
运行结果
OmicsTools软件和分析教程介绍
前言和简介
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