科普|小鼠抗双链DNA抗体检测试剂盒操作指南与性能解析

一、优品生物产品基本信息

用途：科研用途（仅限体外检测，不可用于临床诊断）。

检测目标：小鼠血清、血浆、细胞培养上清液等样本中的天然/重组抗双链 DNA 抗体（dsDNA-Ab）。

规格：48T/96T（含预包被微孔板、校准品、酶标抗体等组分）。

有效期：2℃-8℃保存，6个月；避免冷冻。

二、优品生物试剂盒性能指标

物理性能

液体组分澄清透明，无沉淀或絮状物；微孔板铝箔袋真空密封无破损。

标准曲线

校准品剂量反应曲线相关系数 r≥0.9900。

精密度

批内变异系数（CV%）<10%，批间 CV% <15%。

灵敏度

最低检出剂量 <0.1 IU/mL。

线性范围

1.5 IU/mL – 48 IU/mL。

特异性

识别天然/重组 dsDNA-Ab，与其他结构类似物无交叉反应。

保存条件：未开封试剂盒 2℃-8℃ 保存；开封后组分需冷藏（避免反复冻融）。

三、优品生物的实验原理

采用 间接两步法 ELISA：

抗原包被：微孔板预包被 dsDNA 抗原。

样本孵育：加入样本与标准品，37℃ 温育，形成抗原-抗体复合物。

酶标抗体结合：加入 HRP 标记的抗小鼠 Ig 抗体，37℃ 温育。

显色反应：TMB 底物显色，终止液终止后测定 450nm 波长 OD 值。

结果计算：通过标准曲线拟合（4-参数 Logistic 模型）计算样本浓度。

四、优品生物的操作程序

试剂准备

所有组分复温至室温（至少 120分钟）。

稀释浓缩洗涤液（1:20）并配制底物液（A:B=1:1）。

样本处理

血清/血浆：离心后分装冷冻；避免反复冻融。

细胞培养上清/裂解液：直接检测或冷冻保存。

实验步骤

加样：标准品孔（50μL 不同浓度）、样本孔（50μL，建议复孔）、空白孔（无添加）。

温育：37℃ 30分钟 洗涤（5次，每次静置 20秒）。

酶标抗体：加入 HRP 抗体（100μL），37℃ 30分钟 洗涤。

显色：加入底物混合液（100μL），37℃ 15分钟 加终止液（50μL）。

读数：酶标仪 450nm 波长测定 OD 值。

五、注意事项

避免污染：使用一次性 EP 管、吸头，防止交叉污染。

温度控制：所有试剂需提前平衡至室温，严格按推荐温度操作。

洗涤彻底：自动洗板机需设置浸泡程序，手动洗涤需拍干孔内液体。

样本稀释：若样本浓度超上限，需稀释后重测（结果乘以稀释倍数）。

仪器校准：酶标仪需安装 450nm 滤光片，提前预热 15分钟。