温馨提示:文本由机器自动转译,部分词句存在误差,以视频为准
00:00
症的同学,谁没踩过LPS造膜的坑?今天小M带大家快速搞懂LPS诱导炎症模型的原理和造膜要点。LPS是革兰氏阴性菌外膜的重要成分,应能引起宿主发热等毒性反应,也被称为内毒素。它是一种两亲性分子,由特异性抗原、核心多糖和脂质A组成。根据有无特异性欧抗原,LPS可分为光滑型和粗糙型LPS。由于LPS具有强大的促炎性质,被广泛应用于巨噬细胞极化、炎症造膜免疫刺激和药物筛选研究中。那它诱导炎症的作用机制是什么呢?当LPS进入动物体内或刺激体外细胞时,会快速结合免疫细胞表面的TLR4激活下,由nf cap、帕B等经典炎症通路大量释放TNF alphfa I l、6I Beta等促炎因子,诱导炎症反应。鉴于其强大的促炎特性,LPS已被广泛用于构建炎症及相关模型。
01:03
下面小M带大家了解一下如何选择LPSLS能诱导哪些模型,以及造模过程中的注意事项。首先小M给大家说一下LPS的命名规则,MC网站上不同的LPS代表他们来自于不同的细菌,例如HYD1056是来自大肠杆菌,O5B5血清型的内毒素,血清型不同,激活的炎症途径和炎症因子可能会有差异。其中HYD1056是文献中最为常用的诱导炎症的LPS,而且小M自己也进行了细胞和动物模型的验证哦。此外,小M总结了在体外细胞炎症模型中常用的LPS类型、常见的细胞系LPS处理的浓度、时间和造膜后的检测指标。大家可以截图保存哦,除了细胞模型,LPS已被广泛用于构建多种炎症相关动物模型,如脓毒症、心肌炎、脑炎、急性肺、肝损伤等不同模型。LPS推荐的类型、给药方式、检测指标大家可以截图保存或在MCE官网查看哦。最后,小M带大家了解一下LPS使用过程中的注意事项。
02:17
一定浓度的DMSSO可显著抑制LPS诱导的炎症反应,建议用PBS或水溶解。LPS需避光储存,避免反复动容。LPS具有吸附性,需储存于硅烷化溶器或D吸附离心管中,使用前充分混匀。正式实验前建议多查阅相关文献并进行预实验。以确定最优实验方案。LPS刺激细胞不一定会造成细胞死亡,因此不宜仅仅通过检测细胞活力来确定LPS造膜浓度和时间。LPS造膜期间需定时观察细胞形态变化与动物生理状态。
我来说两句