#!/bin/bash
#把sra文件都存放在Sra文件夹里面
#参考基因组和注释文件都在hg19文件夹里面
#qiujunhui 1801963472@qq.com
mkdir Fastq_out #创建一个存放SRA-toolkit解压sra文件的输出文件夹
mkdir Sam_out #创建一个存放用hisat2比对的输出文件夹
mkdir Sorted.bam #创建一个存放用samtools将sam文件排序的生成的bam文件的文件夹
mkdir Counts #创建一个存放用HTseq-count计算基因表达量的输出文件夹
#批量解压文件
for i in ~/Sra/*sra
do
echo $i
#判断sra文件时单端测序还是双末端测序
num=$(fastq-dump -X 1 --split-spot -Z $i | wc -l | grep [0-9])
if [ $num -eq 4 ];then
echo "$i是单端测序"
fastq-dump $i
mv ~/Sra/*fastq ~/Fastq_out
#用hisat2进行比对
for x in ~/Fastq_out/*fastq
do
echo $x
a=$(echo $x | cut -d "." -f1)
hisat2 -p 5 -x ~/hg19/genome -U $x -S $a.sam
mv ~/Fastq_out/*sam ~/Sam_out
done
else
echo "$i是双端测序!"
fastq-dump --split-files $i
mkdir 1Fastq_out
mkdir 2Fastq_out
mv ~/Sra/*_1.fastq ~/1Fastq_out
mv ~/Sra/*_2.fastq ~/2Fastq.out
#用hisat2进行比对
for j in ~/1Fastq_out/*_1.fastq
do
for h in ~/2Fastq_out/*_2.fastq
do
b=$(echo $j | cut -d "_" -f1)
c=$(echo $h | cut -d "_" -f1)
if [ $b = $c ];then
hisat2 -p 5 -x ~/hg19/genome -U -1 $j -2 $h -S $b.sam
mv ~/2Fastq_out/*.sam ~/Sam_out
fi
done
done
fi
done
#用samtools进行排序
for y in ~/Sam_out/*sam
do
echo $y
d=$(echo $y | cut -d "." -f1)
samtools sort -n -@ 5 -o $d.bam $y
mv ~/Sam_out/*bam ~/Sorted.bam
done
#用HTseq-count进行基因表达量计算
for z in ~/Sorted.bam/*bam
do
echo $z
e=$(echo $z | cut -d "." -f1)
htseq-count -f bam -r name -s no -a 10 -t exon -i gene_id -m intersection-nonempty $z ~/hg19/gencode.v29lift37.annotation.gtf>$ecounts.txt
mv ~/Sorted_bam/*.txt ~/Counts
done
#把不要的文件夹删除只留下counts文件夹
rm -rf ~/Sra
rm -rf ~/Fastq_out
rm -rf ~/1Fastq_out
rm -rf ~/2Fastq_out
rm -rf ~/Sam_out
rm -rf ~/Sorted.bam
全文结束,欢迎在评论区讨论~